Nástroje připravené v laboratoři stanice, kde jsou na stole umístěny 4 očíslované skleněné nádoby (1, 2, 3, 4) o objemu 100 ml se zabroušenými zátkami. Do sklenic 1,3, 4 a 2,8 se nalije čerstvě připravený 2% roztok citranu sodného a do sklenice 70 se nalije 3° alkohol; roztok ve sklenicích 4 a 38 musí být teplý (40-XNUMX°C), aby se injekční stříkačka zahřála před jejím naplněním spermatem.
Pokud byla injekční stříkačka předem sterilizována varem, pak se před odběrem spermatu její vnitřní povrch 5-6x postupně promyje roztokem citrátu sodného ze sklenic č. 3 a 4.
Pokud byla injekční stříkačka skladována s roztokem 70° alkoholu, důkladně ji umyjte, abyste odstranili veškerý zbývající alkohol. Pomocí sterilní gázové ubrousky odstraňte přebytečný roztok ze stříkačky, ubrousek se přitlačí ke kanyle a několikrát se pumpuje vzduch.
Po odběru spermatu se injekční stříkačka drží katetrem nahoru, pohybem pístu směrem dolů, spermie se shromažďuje do válce injekční stříkačky, poté je vzduch vytlačován z katetru, dokud se na špičce kanyly neobjeví kapka spermatu.
Vaginální zrcátko navlhčené teplým roztokem chloridu sodného nebo oxidu uhličitého se zavede otevřením stydkých pysků do pochvy ženy, přičemž se zrcátko drží držadlami na stranu. Poté se zrcátko otočí s rukojetí dolů, opatrně se otevře a po nalezení děložního čípku se do jeho kanálku zavede injekční katétr do hloubky 4-6 cm.Pomalým stisknutím pístu injekční stříkačky se spermie vytlačí. Poté se injekční katétr a poté zrcátko vyjmou, poté, co je opatrně otočíme rukojeťmi na stranu.
Při inseminaci několika krav spermatem jednoho býka je nutné po každém zvířeti dezinfikovat vnější povrch katétru alkoholovým tamponem.
Při inseminaci spermaty od různých býků nejprve ošetřete povrch injekční stříkačky-katétru alkoholovým tamponem, poté jej omyjte od spermatu ze sklenice č. 1, vydezinfikujte alkoholem ze sklenice č. 2 a znovu jej omyjte alkoholem z sklenice č. 3 a 4.
Po inseminaci každé krávy se vaginální zrcátko promyje teplým 2-3% roztokem sody bikarbóny, otře do sucha a dezinfikuje plamenem.
2. RECTO-KERVIKÁLNÍ METODA. S touto metodou aplikovat plastové stříkačky, polystyrenové jednorázové pipety, plastové nebo gumové rukavice.
Před inseminací se roh sáčku s jednorázovými pipetami otře tamponem navlhčeným v 96° alkoholu a přestřihne sterilními nůžkami nebo prorazí koncem pipety. Po prodloužení pipety do jedné třetiny délky ji připojte ke stříkačce a uzavřete sáček zatavením nebo pomocí kancelářské sponky.
Spermie uložené v lahvičce nebo jiné nádobě se pipetují pomocí injekční stříkačky nebo balónku.
Při použití paillet (brček) se inseminace krav a jalovic provádí pomocí inseminačního nástroje. Inseminační nástroj sestávající z krytu, tenkého kovového válce s pístem o délce 450 mm a fixační pružiny se připraví následovně. Sáček s ochrannými kryty se ošetří tampónem napuštěným alkoholem, odřízne se roh a ochranný kryt se nasadí na předem připravenou injekční stříkačku s flitry obsahujícími spermie a zajistí se fixační pružinou.
Po přípravě inseminačního zařízení se provádí následující práce: nasaďte si rukavici na ruku, navlhčete ji teplou vodou (nejlépe mýdlovou) a otevřete vnější stydké pysky krávy nebo jalovice.
Druhou rukou zaveďte pipetu do pochvy. Aby se pipeta nedostala do otvoru močové trubice, pohybuje se nejprve zdola nahoru a dopředu, poté vodorovně, dokud se nezastaví u děložního čípku. Ruka v rukavici je poté vložena do konečníku a děložní čípek je zajištěn mezi ukazováčkem a prostředníkem. Palcem nahmatejte otevření cervikálního kanálu a použijte jej k zavedení pipety nebo injekčního katétru do kanálu. Když nástroj vstoupí do cervikálního kanálu, rotační pohyb přitáhne čípek na pipetu.
Poté, co se ujistíte, že je nástroj zaveden do cervikálního kanálu do požadované hloubky (4-6 cm), se spermie vstříkne pomalým tlakem na píst. Poté se nástroj a ruka vyjmou z pochvy a konečníku zvířete.
3. MANO-KERVIKÁLNÍ METODA INSEMINACE. V sadě nářadí Tento způsob inseminace zahrnuje: polyetylenovou ampuli, katetr, jednorázovou injekční stříkačku, plastové nebo gumové rukavice. Metoda se používá pouze pro inseminaci krav.
Po důkladné toaletě zevního genitálu je kráva inseminována; k čemu: ampule se spermatem se vyjme z termosky, rozmrazí se, pokud je uložena v tekutém dusíku, otře se alkoholem, víčko ampule se odstřihne sterilními nůžkami, kapka spermatu se vytlačí na podložní sklíčko k určení aktivity spermií se ampule připojí ke katétru, aniž by se vyjímal z balícího plastového sáčku.
Nasaďte si na ruku rukavici, namažte ji sterilní vazelínou a fyziologickým roztokem, opatrně vložte ruku do pochvy a prsty lehce masírujte děložní čípek. Druhou rukou se předloží připravená ampule s katétrem a pod kontrolou ukazováčku zavedeme katétr do cervikálního kanálu, masírujeme čípek a ampuli zatlačíme, dokud není nástroj zaveden do hloubky 6 cm. Poté jsou spermie vytlačeny palci a ukazováčky, přičemž se nejprve tlačí na dno a poté směrem k hrdlu ampule. Bez otevírání ampulí opatrně vyjměte katétr a masírujte krk.
U všech metod inseminace bez ohledu na typ uložení spermatu by hloubka zavedení inseminačního nástroje do děložního čípku měla být 4-6 cm Dávka pro inseminaci by měla obsahovat minimálně 10 milionů spermií s aktivním pohybem vpřed.
4. FREKVENCE INSEMINACE. Důležitým faktorem plodné inseminace zvířat je spolu s volbou doby inseminace frekvence inseminace. V souladu s pokyny jsou krávy a jalovice inseminovány dvakrát: poprvé po zjištění jejich říje a podruhé po 10-12 hod. Pokud říje pokračuje, další inseminace se provádějí každých 10-12 hodin, dokud neskončí.
Zkušení technici mohou inseminovat krávy a jalovice jednou. Při stanovení doby inseminace a volbě optimální doby je nutné vzít v úvahu podmínky chovu, krmení a péče o zvířata, jejich věk, tučnost a další faktory. Chování ve vlhkých, tmavých a chladných místnostech bez pohybu, nedostatečné a nedostatečné krmení vede k narušení fyziologických funkcí a průběhu pohlavních cyklů.
Umělá inseminace je metoda reprodukce zvířat, při které se oplodnění provádí zavedením spermatu do pohlavního traktu samice pomocí různých veterinárních nástrojů. Dříve k procesu zabřezávání u hospodářských zvířat docházelo přirozeně, ale tento proces nebyl dostatečně účinný, a tak chovatelé přemýšleli o alternativní metodě inseminace a začali používat umělé oplodnění. Tato metoda umožňuje nejen inseminovat větší počet samic než přirozeným procesem, ale také zkvalitnit chov zvířat a zabránit šíření pohlavně přenosných chorob (brucelóza, vibrióza). Výběr způsobu inseminace závisí na druhu zvířete.
Fáze umělého oplodnění
Před přechodem na proces umělé inseminace je nutné identifikovat krávy, které jsou připraveny k hárání. K tomu specialisté na hospodářská zvířata používají detektory říje. Proces umělého oplodnění zahrnuje pět fází.
- Získání semene. Provádí se pomocí umělé vagíny nebo vycpaného zvířete. U býků se odběr vzorků provádí 2-4krát týdně, u beranů – 2-3krát denně, u hřebců – jednou denně. Vycpané prase se používá k odběru kančího semene. Přistání se provádí jednou za 1-2 dny.
- Hodnocení kvality spermatu. Výsledný biomateriál se musí vyšetřit na kvalitu a stanovit hustotu a aktivitu spermií. K tomuto účelu se používá mikroskop, laboratorní váhy a fotometr.
- Ředění. Aby se prodloužila životnost materiálu a zabránilo se ztrátám aktivity spermií, musí být naředěn speciálně vyvinutým médiem. Ředění se provádí pomocí vodní lázně a dávkovače.
- Zachování. Pro zvýšení trvanlivosti spermatu se používají Dewarovy baňky. Materiál je skladován zmrazený v tekutém dusíku. Níže jsou uvedeny doby skladování spermatu pro různá zvířata, teploty a aktivitu spermií.
– Býk. Spotřebujte do 3 dnů od okamžiku odběru při skladovací teplotě 2-4 o C a aktivitě spermií ne nižší než 7 bodů.
– RAM. Spotřebujte do 2 hodin při skladovací teplotě 4-8 °C a aktivitě spermií ne nižší než XNUMX bodů.
– Kanec. Spotřebujte do 3 dnů od okamžiku odběru při skladovací teplotě 6-10 o C a aktivitě spermií ne nižší než 6 bodů.
– Hřebec. Spotřebujte do 24-36 hodin od okamžiku odběru při skladovací teplotě 2-4 °C a aktivitě spermií ne nižší než 5 bodů
- Zavedení semene. Samice se umístí do kotce a zafixují, načež se provede umělá inseminace v souladu se zvolenou technikou.
Způsob inseminace skotu
Pro umělou inseminaci skotu se používá cervikální metoda, která se dělí na typy podle 3 způsobů inseminace: vizocervikální, manocervikální a retocervikální.
Vizocervikální metoda inseminace. Spermie se vstříknou do děložního čípku do hloubky 4-6 cm pomocí katétrové stříkačky a vaginálního zrcátka. Výhodou metody je, že odborník na hospodářská zvířata proces vizuálně kontroluje. Hlavní nevýhodou této metody je však riziko přenosu infekce od nemocného zvířete a poškození poševních stěn při neopatrné práci se zrcátkem.
Potřebné materiály: injekční katétr, vaginální zrcátko.
Manocervikální metoda inseminace. Podstatou této metody je, že se semeno zavádí do děložního čípku 6-7 cm rukou ve sterilní rukavici pomocí sterilních polyetylenových ampulí a zkráceného polyetylenového nebo polystyrenového katétru. Hlavní výhodou této metody je jednoduchost a eliminace přenosu infekce, protože se používají sterilní nástroje. Tato metoda je však použitelná pouze u velkých plemen s dost širokou vagínou a hrozí zde riziko poranění.
Potřebný materiál: sterilní rukavice, sterilní ampule, katétry.
Rektocervikální metoda inseminace. Tato metoda je nejběžnější. Jeho podstatou je zavedení spermie do děložního čípku s její fixací a kontrolou přes konečník. Výhodou metody je její spolehlivost, žádné riziko infekce a možnost zavést pipetu do větší hloubky díky jejímu menšímu průměru.
Potřebný materiál: jednorázová plastová pipeta, dvougramová nylonová stříkačka s adaptérovou spojkou a gynekologická rukavice.
Umělá inseminace malého skotu
Pro inseminaci malého skotu se používá metoda visocervikální inseminace. Před zahájením inseminace je zvíře vyšetřeno vaginálním zrcadlem na přítomnost onemocnění. Poté se katétr zavede do děložního čípku 1-2 cm a přitlačí se na píst. K inseminaci se používají neředěné i ředěné spermie. Objem neředěných spermií je 0,05 ml, zředěných – 0,1 nebo 0,15 ml. Každá dávka musí obsahovat alespoň 80 milionů aktivních spermií.
Potřebné materiály: vaginální zrcátko, injekční katétr
Způsob inseminace prasat
Existují 2 způsoby inseminace prasat: inseminace zředěným semenem a frakční inseminace.
Inseminace prasat zředěným spermatem. Spermie se ředí syntetickým médiem tak, aby inseminační dávka obsahovala 3-5 miliard aktivních spermií. Po zpracování pohlavních orgánů prasnice se katétr zavede do pochvy 35-40 cm a po zavedení spermií se katétr opatrně vytáhne.
Potřebný materiál: médium na ředění spermatu, katetr
Frakční metoda inseminace. Metoda spočívá v samostatném zavedení zředěných spermií a ředidla. Nejprve se vstříkne mírně naředěné spermie v objemu 40–50 ml, poté se vstříkne glukózo-solné ředidlo v množství 100 ml u dospělých prasnic a 70–80 ml u mladých prasnic. Univerzální katétrová sonda se zavádí do pochvy, dokud nedosáhne děložního čípku, a pomocí Richardsonových kuliček se vstříkne sperma a poté ředidlo. Po 25–30 sekundách se katétr pomalu vyjme. Inseminované prasnice jsou sledovány, aby se identifikovaly možné případy následného opětovného říje.
